全自动定氮仪的原理以及特点
点击次数:1945 发布时间:2017-08-01
蛋白质含量测定方法是生物化学研究中zui常用、zui基本的分析之一。目前常用的方法有全自动定氮仪法(Kjedahl、双缩脲法(Biuret)、紫外吸收法、考马斯亮蓝法(Bradford)。其中Bradford法灵敏度zui高比紫外吸收法灵敏10~20倍Biuret法灵敏100倍以上。 凯氏定氮法虽然比较复杂但较准确往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。
原理:自动定氮仪法测定蛋白质分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定4个过程。其原理是样品中含氮有机化合物与浓在催化剂作用下共热消化,含氮有机物分解产生氨,氨又与 — 作用,变成铵。然后加碱蒸馏 放出氨,氨用过量的硼溶液吸收,再用盐标准溶液滴定求出总氮量换算为蛋白质含量。
特点:
凯氏定氮法是目前分析有机化合物含氮量常用的方法,是测定试样中总有机氮zui准确和zui简单的方法之一,被国内作为法定的标准检验方法。该凯氏定氮法适用范围广泛,用于标准蛋白质的准确测定,干扰少,干扰是非蛋白氮可用三乙沉淀蛋白质而分离测定结果准确,重现性好,但操作复杂费时,试剂消耗量大。费时太长,通常8-10个小时,灵敏度低,测定范围是0.2-1.0mg。
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