全自动定氮仪的具体实验步骤介绍
点击次数:2043 发布时间:2020-04-15
全自动定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。
首先简单为您介绍一下该产品的原理,该产品是将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中,经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点。样本的分析过程的终点很好判断,因为这时混合物会变得无色且透明,在得到的溶液中加入少量氢氧化钠,然后蒸馏。这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量会由反滴定法确定:冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应,而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠滴定。滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。
全自动定氮仪的实验方法有取样、样品消化、蒸馏、滴定四个步骤,其原理较为复杂,使用的试剂也比较多,以下将对这四个步骤进行简单讲述。
1 样品的取样
取样应具有代表性,取样前将样品充分混匀,固体试样可用粉碎设备制成细小均匀粉末。称量放入凯氏定氮瓶时,切勿使样品粘附在瓶颈部,避免样品未消化*而造成氮损失。
2 样品的消化
样品中含氮有机化合物经硫酸在加热的条件下消化,硫酸的作用促使有机物脱水炭化。含氮的有机物炭化并生成碳,碳在将硫酸还原为二氧化硫的反应中,自身则被氧化成为二氧化碳;反应过程中产生的二氧化硫将氮还原为氨气,此过程中其自身则被氧化成三氧化硫;而消化过程生成的氢,又加速了氨的形成。生成的水以水蒸气的形式连同反应过程中生成的三氧化硫一同逸出,而氨气则以硫酸铵的形式留在消化液中。
3、蒸馏
水蒸气发生器中的水要呈酸性,因水中可能含有微量的氨离子,防止其受热溢出而影响测定结果。
4、滴定
氨以气体的形式被释放出来,用硼酸溶液吸收后,使用盐酸或硫酸标准滴定液进行酸碱滴定,从而计算出样品中蛋白质的含量。